新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗临床应用效果实验

郭照成庞亮孙心丛秋实王建琪 韩春娇王风亮郭昌友李叔伟☆

(哈药集团生物疫苗有限公司，黑龙江哈尔滨，150030)

Newcastle Disease and Avian Influenza (H9 Subtype) Inactivated Vaccineclinical application effect of the experiment

GUO Zhaocheng, PANG Liang, SUN Xin, CHONG Qiu-shi, WANG Jian-qi, HAN Chun-jiao, WANG Feng-liang, GUO Chang-you, LI Shu-wei☆

（Harbin Pharmaceutical Group Bio-vaccine Co.,Ltd，Harbin150030，China）

Abstract:This experiment by detecting antibody titer of Newcastle disease,avian flu (H9 subtype) duplex inactivated vaccine of different manufacturer in different inoculation days of age and vaccination dose toevaluate the effect ofthe inactivated vaccine. Results show that chicks in 7-days-oldwere vaccinatedthe inactivated vaccine that produced antibodies is higher than antibodies of 1-day-old vaccination, and the more the dose of vaccination the more antibodies. Through the experiment found the optimalimmune days of ageandimmune doseto provide clinical basis for the prevention of Newcastle disease and H9avian influenza.

Keywords:Newcastle disease, H9avian influenza,HI

摘要：本实验通过对不同厂家的新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗在不同接种日龄和不同接种剂量产生抗体效价值的情况，来评价新流二联灭活疫苗对鸡群预防新城疫和H9流感疫病的效果。结果表明雏鸡在7日龄接种新流二联灭活疫苗所产生的新城疫和H9抗体值高于1日龄接种所产生的抗体值，且接种的剂量越大所产生的抗体值越高。通过本实验找到最适合鸡群免疫此疫苗的免疫日龄和免疫剂量，为我们预防新城疫和H9流感疫病提供临床效果的依据。

关键词：新城疫、H9亚型流感、HI

鸡新城疫是禽类主要病毒性传染病之一，对养鸡业的危害极大[1]。近年来，ND在我们有普遍蔓延的趋势，目前许多鸡场仍将采用接种疫苗的方式来预防该病。对于新城疫疫苗，我国主要是引进国外的一些弱毒株，如V4株、La Sota株和B1株等[2]，来预防鸡ND。近年来，H9N2亚型禽流感流行日益频繁，病毒也进入一个快速进化阶段，许多鸡场的鸡接种疫苗后保护效果较差，2002年后H9N2亚型禽流感在商品肉鸡上发病日益严重，造成较高死亡率[3]。而从2007年后，由于H9亚型分支发生改变，H9引起的临床症状也发生改变，国内开始采取最近地方分离出来的H9毒株来预防此类疾病。

近些年我国鸡ND和H9混合感染的几率在逐年上升，目前使用新流二联疫苗预防这两种疾病效果很好，但是很多地区在使用此类疫苗时，免疫方法和接种剂量都有所不同，本实验通过对蛋雏鸡接种新流二联疫苗，在不同首免日龄和不同免疫剂量进行抗体检测，以此找出最佳的免疫时间和免疫剂量，为预防ND和H9疫病提供理论依据。

1材料与方法

1.1试验动物

 1日龄商品蛋雏鸡5500只，黑龙江省哈尔滨市某养殖场。

1.2试验用药

哈药疫苗：黄瓶新流二联灭活疫苗20150507、视界新流二联灭活疫苗20150310、国内某厂家新流二联灭活疫苗，国外某厂家新流二联灭活疫苗、ND和H9标准抗原及阳性血清购自中国兽医药品监察所。

1.3试验设计

分组情况：蛋雏鸡鸡每组500只，详见表1：

表1实验分组情况

A、B、C、D组1日龄按以上疫苗进行免疫，免疫前采血，进行新城疫和H9抗体检测。免疫后的7、14、21天每组随机抽取20只鸡采血，分离血清，进行新城疫和H9抗体检测，并计算平均值。

E、F、G、H、IJ、K组7日龄按以上疫苗进行免疫，免疫前采血，进行新城疫和H9抗体检测。免疫后的7、14、21天采血，分离血清，进行新城疫和H9抗体检测，并计算平均值。

2结果与分析

表2 不同厂家0日龄相同免疫剂量ND抗体效价（log2）

相同剂量，在1日龄免疫不同疫苗，在14日龄开始产生新城疫抗体值，在21日龄时，A、C组免疫效果要好于D组，A组免疫效果最好。

表3 不同疫苗、不同日龄、相同的免疫剂量ND抗体效价（log2）

1日龄首免和7日龄首免新流油苗，从结果看7日龄首免，在免疫后21天产生的新城疫抗体值要高于1日龄首免。E组新城疫抗体值要高于F组。

表4 相同的日龄，不同免疫剂量ND抗体效价（log2）

从结果看，在免疫同意疫苗14天产生新城疫抗体值看，到免疫后21日龄I组相对较好，也就是说免疫剂量大的抗体值更好一些。但是免疫0.1和0.2ml剂量从疫苗开始产生抗体值看，也能够对新城疫病起保护作用。

表5 相同免疫剂量ND抗体效价（log2）

相同剂量不同疫苗在7日龄免疫后，免疫后的14—21日龄H,I组新城疫抗体值要明显好于K组，到免疫后的21日龄，I组效果更好。

表6 不同厂家，1日龄免疫相同剂量H9抗体效价（log2）

在1日龄免疫相同剂量的不通过疫苗，在疫苗免疫7天后，7日龄H9抗体值D组较高，B组次之，免疫后的14、21日龄,四个组H9抗体值都相对偏低，这可能与免疫日龄和免疫剂量有关。

表7不同疫苗、不同日龄、相同的免疫剂量H9抗体效价（log2）

1日龄首免和7日龄首免新流油苗，从结果看7日龄首免，在免疫后21天产生的H9抗体值要高于1日龄首免。E组抗体值要高于F组。

表8相同的日龄，不同免疫剂量H9抗体效价（log2）

不同剂量相同疫苗在7日龄首免，从结果看免疫剂量最大的I组H9免疫效果最好，免疫剂量最小的F组免疫效果相对不高。

表9相同免疫剂量H9抗体效价（log2）

相同剂量不同疫苗在7日龄首免后，在免疫后21日日龄看，H、I组H9免疫效果要高于K组；H组与I组相比较，I组免疫效果要好于H组。

3讨论

3.1对于蛋雏鸡来说，目前免疫新流二联灭活疫苗的首免时间主要有两个，一个是在1日龄进行首免，还有就是在7日龄左右进行首次免疫。通过1日龄首免和7日龄首免进行抗体效价的对比看，7日龄首免的抗体值要高一些，这与母源抗体有关系。目前雏鸡ND和H9流感的母源抗体值相对很高，本实验ND的母源抗体值在6log2以上，H9的抗体值在8log2以上，在这种情况下，母源抗体能维持雏鸡21日龄，此时抗体值能为此4log2左右，对鸡群是有保护力的，那么在这种情况下，7日龄首免新流二联灭活疫苗所产生的抗体值就会受母源抗体的干扰小，在抗体效价和保护持续时间上都要比1日龄首免效果好一些。

3.2目前很多地区对于油苗的接种剂量也存在不同的看法，本实验选取哈药生物疫苗一款高端新流二联灭活疫苗分三个剂量0.1ml、0.2ml、0.3ml分别对鸡群进行接种，检测免疫后产生的抗体水平高低，首免日龄是7日龄。从结果看接种剂量最大的所产生的抗体值也是最高的，接种剂量与抗体值成正比关系。接种剂量0.1ml所产生的抗体值对鸡群也有保护力，那么具体接种剂量根据实际情况定，如在ND和H9感染压力大的地区，接种剂量就要用0.3ml，感染压力相对轻微的地区接种剂量可以是0.1ml或者是0.2ml。在秋冬季节时接种疫苗也要使用最大剂量。

3.3目前我国使用新流二联灭活疫苗预防ND和H9的发生，各生物疫苗厂家新流二联疫苗在抗体效价方面略有差别，从实验结果看不同厂家新流二联疫苗接种后所产生的ND和H9抗体值有差别，但是差异不显著，这主要是与生产工艺有关系。新流二联灭活疫苗当中的H9毒株各厂家都不想同，目前我们所使用的H9毒株大部分都是地方分析毒株，而国家标准毒株使用较少。我国H9亚型AIV在2007年之前，是以第h9.4.2.1、第h9.4.2.2分支、第h9.4.2.3分支和第h9.4.2.4分支为主的，2007年之后，我国H9亚型AIV以第h9.4.2.5分支为主，而且随着毒株流行的不同，H9疫病的临床表现也不相同。所以说我们在使用新流二联疫苗时，所选用的H9毒株要尽可能使用H9亚型AIV以第h9.4.2.5分支上的。

参考文献

[1]蔡宝祥,殷震,谢三星等.动物传染病诊断学[M].(南京:江苏科学技术出版社), 1993.177～180.

[2]严维巍,王永坤,田慧芳等.一株鸡副粘病毒的分子特性研究[J].扬州大学学报(自然科学版), 2000.3(1):27～31.

H9N2

[3]刘东,宫晓,刘晓东.亚型禽流感流行分析及疫苗毒株的筛选[J].中国动物检疫, 2013.6:45～47.